Skip to content

Institutul Cantacuzino

Profesionalismul si experienta noastra pentru sanatatea dumneavoastra !
Articole in aceasta categorie:
  • Laborator Enzimologie si Microbiologie Aplicata
  • Unitatea de Management Cercetare
  • Platforma Tehnologica
  • Laborator Patologie Experimentala
  • Cercetare
  • Laborator Imunomodulare
  • Laborator Imunitate Antiinfectioasa
  • Laborator Imunologie Celulara
  • Laborator Receptori Celulari

  • LABORATOR ENZIMOLOGIE SI MICROBIOLOGIE APLICATA

    Sef Laborator : Nadia Bucurenci, PhD, CS I, nadiab@cantacuzino.ro

    Personal permanent:

    Adrian Onu, PhD, CS I, Adrian.Onu@cantacuzino.ro
    Adriana Zoe Costache, Drd., CS III, aradulescu@cantacuzino.ro
    Ana-Maria Eftimie, MS, CS, aeftimie@cantacuzino.ro
    Florina Toma, MS, Drd., CS, tflorina@cantacuzino.ro

    Domeniul de Cercetare:
    Activitati de baza: clonarea, purificarea si caracterizarea fizico-chimica a proteinelor (enzimelor) bacteriene.

    Subiectele majore de studiu :

    • Cautarea de noi tinte terapeutice, din familia nucleozid monofosfat kinazelor, in bacteriile patogene rezistente la antibiotice
    • Noi metode de diagnostic utilizind anticorpi mono sau policlonali sau reactii enzimatice cuplate; obtinerea si purificarea de subunitati de toxine, antigene bacteriene etc.
    • Metode de regenerare enzimatica a ATP sau NADH pentru sinteze enzimatice industriale cu reactii de fosforilare sau oxidare / reducere
    • Implementarea si optimizarea procesului tehnologic de obtinere a serurilor terapeutice cu componenta activa F(ab’)2 fata de agenti inalt patogeni bacterieni si virali

    Activitati stiintifice:
    UMP kinaze bacteriene din organisme patogene
    UMP kinazele bacteriene nu prezinta nici un fel de omologie de secventa cu celelalte NMP kinaze cunoscute, sint hexameri in solutie si activitatea lor enzimatica este supusa unor reglari complexe de catre GTP (activator) si UTP (inhibitor).
    Studiile anterioare demonstrasera ca intre UMP kinazele din organisme gram pozitive si cele din organisme gram negative exista diferente importante. Am aprofundat acest subiect si am testat comportamentul cinetic al UMP kinazelor din S.aureus, E.faecalis, P.aeruginosa (enzime clonate anterior in institutul nostru) in special in ceea ce priveste reglarea activitatii enzimatice de catre GTP si UTP.
    Datele cinetice au fost confirmate de analiza structurii cristaline a UMP kinazei din E.coli realizata de I.Pasteur – Paris in colaborare cu alte unitati de cercetare din Franta.
    GMP kinaze bacteriene
    GMP kinazele din eucariote sint monomeri si au fost mult studiate datorita importantei lor medicale (activeaza analogii de guanozina utilizati in terapia cancerului si a infectiilor virale).
    S-a demonstrat recent ca structura GMP kinazei din E.coli (clonata in laboratorul nostru) are caracteristici unice, care o diferentiaza de ortologii din eucariote, inclusiv de enzima murina care este considerata modelul GMP kinazei umane. Extensia C-terminala, prezenta la enzima din E.coli si din alte bacterii inrudite, dar absenta la eucariote, este un determinant critic in formarea unitatii dimerice care sta la baza structurii cuaternare a enzimei.
    Gasirea situsului de legare al GDP, care este in conflict steric cu situsul de legare al ATP, poate sta la baza cautarii unor inhibitori specifici pentru GMP kinazele din bacterii patogene.
    In unitatea noastra au fost clonate si studiate patru GMP kinaze din bacterii patogene (S.aureus, E.faecalis, P.aeruginosa, S.pneumoniae)

    Sisteme regenerative pentru ATP si NADH
    In multe sinteze enzimatice sint implicate reactii de fosforilare, in care ATP este donorul de fosfat, sau reactii de transfer de electroni, in care NADH este donorul de electroni. Ambele substante avind un cost ridicat este necesara regenerarea lor in cursul sintezei astfel incit procesele sa fie convenabile din punct de vedere economic.
    a) Dintre reactiile posibile de regenerare a ATP am testat cuplul acetat kinaza (AceK) / acetil-fosfat (AcP) ; am folosit AcP sintetizat in laborator sau AcP generat in situ printr-o serie de reactii enzimatice. Am demonstrat fezabilitatea sintezelor de fosforilare a nucleozidelor (Gua) pina la nucleozid trifosfati (GTP), folosind un sistem de regenerare al ATP (AceP generat in situ/ AceK) si enzime recombinante obtinute “in house”.
    b) Regenerarea NADH se face intr-un sistem de reactii care pleaca de la NAD si glucoza si utilizeaza doua enzime clonate si purificate de noi: glucozo dehidrogenaza (GDH) si galactozo mutarotaza (GalM). Utilizind acest sistem am reusit sa producem NADH pornind de la NAD cu un randament de aprox. 80%.

    Clonarea si purificarea de toxine sau antigene bacteriene in scop diagnostic
    Diagnostic rapid al dizenteriei si colitelor hemoragice
    Scopul final al proiectului, realizat in colaborare cu institute din cadrul Retelei Institutelor Pasteur si Asociate, este obtinerea de strip-uri pentru diagnosticul rapid al unor agenti enteropatogeni, printre care S. dysenteriae si E.coli O157. Acesti patogeni produc toxina Shiga, respectiv toxina Shiga-like 1 si 2. Toxinele sint compuse din cite 5 subunitati B, care asigura legarea toxinei de celula tinta si o subunitate A, responsabila de activitatea toxica. Participarea noastra la proiect a constat in producerea, purificarea si controlul antigenelor tinta (subunitatile B ale toxinelor).
    Subunitatea B a toxinei Shiga, identica cu toxina Shiga-like 1, a fost folosita pentru obtinerea de anticorpi monoclonali iar subunitatea B din toxina Shiga-like 2 pentru testarea unor eventuale reactii incrucisate ale anticorpilor monoclonali obtinuti.

    Depistarea antigenelor specifice toxoplasmozei, cu anticorpi monoclonali, la gravidele cu seroconversie
    Diagnosticul modern al toxoplasmozei se face prin depistarea antigenelor circulante, fie prin tehnici de tip PCR, fie utilizind anticorpi monoclonali marcati. Proiectul, realizat in colaborare cu alte laboratoare din institut, si-a propus utilizarea nucleozid-trifosfat hidrolazei (NTP-aza) din Toxoplasma gondii ca antigen pentru obtinerea anticorpilor monoclonali.
    Primul obiectiv a fost clonarea uneia din izoformele NTP-azei, supraexpresia si purificarea in cantitati suficiente pentru imunizari si detectie. Pentru clonare s-a utilizat ADN-ul genomic din tachizoiti intrucit secventa care codifica NTP-aza nu continea introni Enzima a fost purificata din corpii de incluziune si utilizata ca atare.

    Realizarea unui nou test tuberculinic cutanat, cu utilizarea antigenelor recombinante specifice pentru diagnosticul tuberculozei (TB) latente si active
    Proiectul, in colaborare cu laboratorul de profil din institut, urmareste realizarea unui nou test tuberculinic cutanat pentru diagnosticul tuberculozei latente si active, prin intradermoreactie (IDR, testul Mantoux). Testul actual, IDR la derivatul proteic purificat (PPD) din Mycobacterium tuberculosis (M.tb), are o specificitate redusa pentru TB. Reactiile incrucisate se datoreaza vaccinarii cu BCG, o tulpina atenuata de M. bovis, sau infectarii cu mycobacterii netuberculoase (NTM).
    Dintre proteinele din filtratul de cultura care sint exprimate si/sau secretate doar de M.tb si nu de BCG sau NTM, am clonat patru (ESAT-6, CFP10, MPT64, PPE68). Proteinele vor fi supra-exprimate in E. coli, si testate, ca atare sau in amestec, pentru obtinerea raspunsurilor IDR la cobai sensibilizati cu M.tb H37Rv.

    Implementarea si optimizarea procesului tehnologic de obtinere a serurilor terapeutice cu componenta activa F(ab’)2 fata de agenti inalt patogeni bacterieni si virali.
    Utilizarea anticorpilor policlonali ca agenti terapeutici cunoaste o revigorare deoarece acestia asigura o protectie semnficativa dupa expunerea la un agent toxic, in absenta unei vaccinari anterioare sau cind raspunsul imun este foarte scazut. Utilizarea exclusiva a fragmentelor F(ab’)2 bivalente comparativ cu utilizarea imunoglobulinei integrale reduce semnificativ reactiile de hipersensibilitate si sporeste gradul de siguranta a produsului final.
    Obiectivul major al proiectului este punerea la punct, pe scara de laborator, a procedurilor de obtinere a unor seruri terapeutice, cu componenta activa reprezentata de fragmente F(ab’)2 bivalente, rezultate prin digestia enzimatica cu pepsina, in mediu acid, a plasmei (serului) hiperimune fata de agenti inalt patogeni bacterieni si virali (Bacillus anthracis, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Influenza virus H5N1), cu rol potential in biosiguranta nationala. Avantajul major al metodologiei ce urmeaza a fi elaborata deriva din plasticitatea procedeului tehnologic care va putea fi adaptat pentru productia de seruri terapeutice fata de diferite antigene.

    Toate aceste cercetari au fost finantate prin contracte de cercetare nationale (in cadrul programelor BIOTECH , VIASAN, Parteneriate in Domenii Prioritare) sau internationale (in cadrul Retelei Institutelor Pasteur si Asociate)

    Publicatii (2000 – 2008):

    • Genetic and Biochemical Characterization of Salmonella enterica Serovar Typhi Deoxyribokinase – L.Tourneux, N.Bucurenci, C.Saveanu, P.A.Kaminski, M.Bouzon, E.Pistotnik, A.Namane, P.Marliere, O.Barzu, I.L.de la Sierra, J.Neuhard, A.M.Gilles, 2000, J.Bact., 182(4), 869 – 873
    • Sugar specificity of bacterial CMP kinases revealed by crystal structures and mutagenesis of Escherichia coli enzyme – T.Bertrand, P.Briozzo, L.Assairi, A.Ofiteru, N.Bucurenci, H.Munier-Lehmann, B.Golinelli-Pimpaneau, O.Barzu, A-M.Gilles, 2002, J.Mol.Biol., 315, 1099-1110
    • Comparative modelling and immunochemical reactivity of Escherichia coli UMP kinase – G.Labesse, N.Bucurenci, D.Douguet, H.Sakamoto, S.Landais, C.Gagyi, A-M.Gilles, O.Barzu, 2002, Biochem.Biophys.Res.Commun., 294, 173-179
    • UMP kinase from the Gram-positive bacterium Bacillus subtilis is strongly dependent on GTP for optimal activity – Cristina Gagyi, Nadia Bucurenci, Ovidiu Sirbu, Gilles Labesse, Mihaela Ionescu, Augustin Ofiteru,Liliane Assairi, Stephanie Landais, Antoine Danchin, Octavian Barzu and Anne-Marie Gilles, 2003, Eur.J.Biochem., 270, 3196–3204
    • Factors associated with virulence and survival in environmental and clinical isolates of Vibrio cholerae 01 and non 01 in Romania – Anca Israil, Carmen Balotescu, Nadia Bucurenci, Nadia Nacescu, Claudia Cedru, Cornelia Popa, C.Ciufecu, 2003, Roum. Arch. Microbiol. Immunol., 62(3-4), 155-177
    • Comparative study of different methods for detection of toxic and other enzymatic factors in Vibrio cholerae strains – Anca Israil, Carmen Balotescu, Maria Damian, Cristina Dinu and Nadia Bucurenci, 2004, Roum. Arch. Microbiol. Immunol., 63 (1-2), 63-77
    • Characterization of Vibrio cholerae strains isolated in the Republic of Moldavia between 1995-1999 – Anca Israil, Carmen Balotescu, Ionela Alexandru, Radu Cojocaru, Nadia Bucurenci, Valeriu Chicu, Ludmila Mutoi, 2005, Roum. Biotechnol. Lett., 10 (6), 2441-2445
    • Calorimetric and crystallographic analysis of the oligomeric structure of Escherichia coli GMP kinase – Guillaume Hible, Louis Renault, Francis Schaeffer, Petya Christova, Adriana Zoe Radulescu, Cecile Evrin, Anne-Marie Gilles, Jacqueline Cherfils, 2005, J.Mol.Biol., 352, 1044-1059
    • Structural and functional consequences of single amino acid substitutions in the pyrimidine base binding pocket of Escherichia coli CMP kinase – Augustin Ofiteru, Nadia Bucurenci, Emil Alexov, Thomas Bertrand, Pierre Briozzo, Hélène Munier-Lehmann, Anne-Marie Gilles, 2007, FEBS Journal, 274(13) , 3363–3373
    • Regulatory mechanisms differ in UMP kinases from gram-negative and gram-positive bacteria – Evrin C, Straut M, Slavova-Azmanova N, Bucurenci N, Onu A, Assairi L,Ionescu M, Palibroda N, Barzu O, Gilles AM., 2007, J.Biol. Chem, 282(10), 7242-7253
    • Fluorescent Study of the Interaction between Staphylococcus aureus UMP kinase and UTP – C.Chilom, D. Gazdaru, N. Bucurenci, M. Straut, A. Popescu, 2007, J.of Optoelectronics and Advanced Materials, 9(8), 2585-2588
    • Characterization of Guanylate Kinase from gram positive and gram negative microorganisms; preliminary results – Ana-Maria Ruxandra Eftimie, Florina Toma, Adriana-Zoe Costache and Nadia Bucurenci, 2007, Roum. Arch. Microbiol. Immunol., 66(1-2), 22-25
    • Stereoselective synthesis of L-[15N] amino acids with glucose dehydrogenase and galactose mutarotase as NADH regenerating system – Maria Chiriac, Iulia Lupan, N. Bucurenci, O. Popescu, N. Palibroda, Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals , 2008, 51 (4) , 171-174



    UNITATEA DE MANAGEMENT PROGRAME CERCETARE are rol in monitorizarea financiara a proiectelor de cercetare desfasurate in cadrul INCDMI Cantacuzino, si finantate de MEdC , CNCSIS sau prin fonduri si programe europene.



    PERSONAL:

    -          GABRIELA STAN , economist II , gabriela.stan@cantacuzino.ro

    -          MIHAELA PAVEN, operator calculator I , mihaela.paven@cantacuzino.ro

    -          MARIA BUCUR , referent I , maria.bucur@cantacuzino.ro

    -          NICOLETA CETATEANU , psv I



    UMPC asigura urmatoarele activitati:

    - Elaborarea sau definitivarea documentatiei necesare pentru participarea la competitii;

    - Elaborarea sau definitivarea documentatiei necesare actelor aditionale si raportarilor periodice;

    - Centralizarea datelor si intocmirea rapoartelor pentru monitorizarea activitatii de cercetare;

    - Inregistrarea cererilor de materiale si a referatelor de necesitate intocmite pe proiecte de cercetare;

    - Predarea documentatiei proiectelor la autoritatea contractanta;

    - Intermedierea relatiei cu comisia de audit extern.



    techplat



    PLATFORMA TEHNOLOGICĂ



    Laboratorul Platforma Tehnologică  a fost infiinţat cu scopul de a furniza accesul  cercetătorilor din Institutul Cantacuzino la  dezvoltarea de reactivi si teste specifice,  în cadrul proiectelor lor  de cercetare şi dezvoltare. Avem, de asemenea, în curs de desfăşurare proiecte ştiinţifice şi cu parteneri externi din mediul academic, de cercetare şi bioindustrie, la nivel naţional şi internaţional.

    Principalele noastre interese de cercetare-dezvoltare includ: producerea de anticorpi monoclonali împotriva agenţilor patogeni zoonotici majori pentru  sănătatea publică (virusul gripal, Leptospira spp., flavivirusuri / arbovirusuri); imunoteste pe bază de anticorpi monoclonali; cercetări în imunitatea şi patogeneza infecţiilor virale; cercetări privind imunitatea neonatală; dezvoltarea de anticorpi monoclonali / recombinanţi cu potenţial terapeutic uman.


    Serviciile noastre includ:

    • Recomandări pentru  prepararea antigenelor

    • Dezvoltarea de anticorpi monoclonali (amc) de şoarece si şobolan prin tehnologia hibridomului

    • Tipizarea si subtipizarea  amc

    • Purificarea şi de marcarea anticorpilor

    • Crioconservarea hibridoamelor pe termen lung

    • Consultanţă în/şi caracterizarea detaliată a amc (inclusiv secvenţierea genelor codificatoare pentru domeniile VH-VL)

    • Dezvoltarea de imunoteste pe bază de amc pentru utilizare în cercetare,  diagnostic si  industria biotehnologică

    • Analize prin cromatografie lichidă de înaltă performanţă (HPLC)

    • Preparare de culturi de celule primare si teste in vitro pe bază de celule umane / animale

    Laboratorul nostru are certificare in sistemul de management al calitatii ISO 9001:2000.


    Personal de contact

    Şef de laborator:

    Radu Iulian TĂNASĂ, doctor-medic veterinar, doctor in ştiinţe medicale, CS III

    Institutul Naţional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie si Imunologie “Cantacuzino”

    Splaiul Independenţei 103,

    Sector 5, Bucureşti 050096

    Telefon: 021-5287283

    E-mail: rtanasa@cantacuzino.ro

    Specialist in cromatografie:

    Mihaela-Cristina GHEORGHE, master in chimie, doctorand, CS

    Telefon: 021-5287280


    ______________________________________________________________________


    Publicaţii:

    Tanasa RI, Trad A, Lange H, Grötzinger J, Lemke H, 2009. Allergen IgE-isotype-specific suppression by maternally derived monoclonal anti-IgG-idiotype. Allergy (accepted for publication).


    Tanasa RI, Lupulescu E, Stavaru C, Baetel AE, Necula G, Vuta V, G. Barboi G, Popovici A, L. Banica L, Besliu A, Marineata S, 2009. Development of monoclonal antibodies for detection of highly pathogenic avian influenza virus H5 subtype. COST ACTION B28 “Array technologies for BSL3 and BSL4 pathogens”. 7Th Management Committee and WG1, WG2, WG3, WG4 and WG5 meetings, April 22-24, Belgrade, Serbia, pp 23-24


    (http://sites.google.com/site/costb28belgrade/abstracts)

    Lemke H, Tanasa RI, Trad A, Lange H, 2009. Benefits and burden of the maternally-mediated immunological imprinting. Autoimmunity Reviews 8: 394-399.


    Lange H, Zemlin M, Tanasa RI, Trad A, Weiss T, Menning H, Lemke H, 2008. Thymus-independent type 2 antigen induces a long-term IgG-related network memory. Molecular Immunology 45: 2847-2860.


    Tanasa R., Popovici A., Cismileanu Ana, Veronica Tanasa, Beatrice Stirbu-Teofanescu, 2005. Immunohistocytochemical techniques used for the study of small ruminant retrolentiviroses. Revista Romana de Medicina Veterinara 15(1): 160-167 (in Romanian with English abstract).


    Tanasa R., Barboi G., Gheorghe L., Turcu D., Popovici A., 2004. Cultivation and identification of maedi-visna virus in homologous and heterologous cell cultures. Studies and Researches in Veterinary Medicine (Bucharest) 10: 47-66 (in Romanian).


    Sorescu I., Tanasa R., Gheorghe L., Mardare A., Chioveanu M., 2003. Attempts to in vitro cultivate honeybee haemocytes. Studies and Researches in Veterinary Medicine (Bucharest) 9: 123 – 131.


    Marineata S., Cernescu C., Predeteanu D., Tanasa R., 2003. The role of infections in the aetiopathogenesis of rheumatoid arthritis. Revista de Reumatologie XI (3-4): 13-22 (in Romanian).


    LABORATOR PATOLOGIE EXPERIMENTALĂ


    Şef de laborator:


    Dr. Medic Veterinar Bogdan MARINESCU

    mbogdan@cantacuzino.ro

    Participant în proiecte : NATO, CEEX, NUCLEU

    Master în Securitatea Comunitară şi Terorismul

    Vicepreşedinte al Asociaţiei Române pentru Ştiinţa Animalelor de Laborator

    Membru al Colegiului Medicilor Veterinari din România

    Membru al Societăţii Române de Imunologie




    Personal angajat permanent:


    Ing. Biotehnolog Andreea MARINCU

    andreea.marincu@cantacuzino.ro

    Competenţă în activitatea Sanitar-Veterinară aplicată pentru animalele de laborator

    Secretar al Asociaţiei Române pentru Ştiinţa Animalelor de Laborator


    Tehn. Veterinar Ecaterina TĂNASE

    Competenţă în activitatea Sanitar-Veterinară aplicată pentru animalele de laborator



    Domeniul de activitate: – Medicină experimentală


    Asigurarea implementării şi urmăririi legislaţiei naţionale Sanitar-Veterinare privind utilizarea animalelor de laborator în scopuri ştiinţifice şi  experimentale.

    Activitate de bază în realizarea procedurilor operaţionale efectuate la animalele de laborator pentru realizarea anumitor proiecte.

    Cercetare în realizarea modelelor experimentale pentru animale de laborator.

    Efectuarea de teste „in vivo“: Testul de toxicitate anormală (IV), Testul de hipersensibilizare pe cobai.


    Cercetare

    Nov 28

    CERCETARE

    Domenii de Cercetare:

    Echipa de cercetare este implicata in studii ce vizeaza elaborarea si dezvoltarea de modele experimentale in vivo si in vitro (sisteme acelulare sau celulare), care sa furnizeze informatii despre proprietatile imunomodulatorii (antitumorale si/sau antiinflamatorii) ale compusilor naturali/sintetici purificati. Cercetarile au ca subiect:

    - implicarea produselor analizate in activitati biologice cum sunt: modularea pompelor de transport (Pgp, MRP) exprimate pe diverse linii celulare normale si tumorale. Aceste pompe sunt implicate in dezvoltarea rezistentei fata de antibiotice si substante chimioterapice. Identificarea potentialilor inhibitori ai pompelor de eflux PgP si MRP poate creste eficacitatea tratamentelor in cazul tumorilor rezistente la chimioterapice.

    - inhibarea activitatii unor enzime implicate in metabolismul acidului arahidonic (COX-2, 5-LO);

    - modularea semnalizarii prin NF-kB, PI3K, Akt/PKB sau PPAR-γ declansata prin activarea receptorilor Toll-like (TLRs) si Dectin1, membri ai familiei Pattern Recognition Receptors (PRR), cu rol esential in raspunsul imun innascut fata de bacterii, respectiv fungi.

    Rezultatele noastre permit tintirea de noi strategii terapeutice in patologii cu componenta inflamatorie, dar si identificarea de noi compusi bioactivi cu aplicatii in industria farmaceutica.

    Pornind de la ideea interdependentei intre sistemul nervos si sistemul imun, preocuparile noastre vizeaza si inflamatia neurogenica, avand expertiza pentru studii in vivo folosind modele animale (pletismometrie computerizata, soc endotoxic, modularea productiei de anticorpi, testarea actiunii antitumorale, studii comportamentale).

    Participam curent la studii inter-disciplinare: aplicatii biomedicale ale jeturilor de plasma la presiune atmosferica, microparticule implant in terapia tumorilor, nanobiologie – efectele biologice ale nanopulberilor pe baza de TiO2.

    In perioada aprilie 2010 – iulie 2012, Laboratorul a fost acreditat RENAR conform SR EN ISO/CEI 17025:2005 pentru „Determinarea capacitatii antioxidante a produselor hidrosolubile prin metoda ORAC”.

    Expertiza:

    - Eliberarea de citokine pro si antiinflamatorii – ELISA

    - Teste de citotoxicitate/viabilitate pe linii celulare normale si tumorale – tehnica MTT

    - Masurarea productiei de SRO (specii reactive de oxigen) intracelulari – fluorimetrie;

    - Eliberarea de SRO din celule activate – chemiluminometrie cu luminol sau lucigenina;

    - Cuantificarea productiei de oxid nitric in macrofage activate – metoda colorimetrica Griess;

    - Determinarea capacitatii antioxidante a produselor hidrosolubile – ORAC;

    - Testarea capacitatii antitumorale (melanom) a unor compusi naturali/sintetici – studii in vivo;

    - Testarea activitatii PI3K-g determinata prin cuantificarea nivelului de fosforilare a PKB/Akt – Westernblot, ELISA;

    - Modularea activitatii/activarii receptorilor TRPV1 in vivo – studii comportamentale – Capsaicin induced Eye Wipe Test; inducerea edemului plantar prin injectarea de capsaicina;

    -  Identificarea capacitatii modulatorii a unor produsi asupra:

    • artritei experimentale induse cu Colagen II (pletismometrie computerizata)
    • artritei cronice poliarticulare induse cu Mycobacterium tuberculosis (pletismometrie)
    • socului endotoxic indus de LPS

    -  Testarea in vivo (soareci) a actiunii antiinflamatoare a compusilor cu aplicatie topica.

     

    N.B. Tehnicile mentionate pot fi efectuate si la cerere.

    LABORATORUL IMUNOMODULARE

     

    I.N.C.D.M.I. Cantacuzino

    Splaiul Independentei 103,
    Sector 5, 050096 Bucuresti
    Tel: 021-3069298,  021-3069251, 021-5287298; 021-5287251
    Fax: 021-3069298; 021-5287298

     

     

    Sef laborator : Lidia Cremer, Dr. ( CV )
    as Email: immunomod@cantacuzino.ro

    Cercetator stiintific principal gr.II

    Doctor in medicina

     

     
     

    Sediul central:

     

    Geza Adalbert Szegli, Dr.
    as Email: gszegli@cantacuzino.ro

    Cercetator stiintific principal gr.I, consilier
    Doctor in medicina, expert OMS

     

    Ana Calugaru, Dr. ( CV )
    erg Email: sni@cantacuzino.ro

    Cercetator stiintific principal gr.II

    Doctor in biologie

     

     

    Andreea-Roxana Lupu, Dr. ( CV )
    rtrh Email: ldreea@yahoo.com

    Cercetator stiintific principal gr. III, Master in neurobiologie
    Doctor in biologie

     

     

     

     

     Asistenta tehnica:

     


    sd Fanica Dascalu – asistent medical principal

    rfbed Lucia Nedu – Laborant

     

     

     

     

     

     


    IMUNITATE ANTIINFECŢIOASĂ



    Şef de laborator: Aurora Sălăgeanu, chimist principal, CS II, doctor in chimie, immuno@cantacuzino.ro


    Personal:


    Iuliana Caraş, biochimist specialist, CSIII, doctorand, immuno@cantacuzino.ro

    Iuliana Francisca Anghelache, chimist, doctorand [concediu de maternitate]

    Florentina Alina Dumitru, CS, medic specialist alergologie-imunologie clinică [detaşată la Imperial College London], a.f.dumitru@gmail.com

    Lucian Lerescu, medic specialist medicină de laborator, CS, llerescu@cantacuzino.ro

    Cătălin Ţucureanu, biochimist, asistent de cercetare, ctucureanu@cantacuzino.ro

    Ramona Pitica, biolog, asistent de cercetare, immuno@cantacuzino.ro

    Camelia Tabârţă, tehnician



    Domeniul de cercetare:



    Principalele domenii de interes sunt: imunitate înnăscută, inflamaţie şi imunomodulare.

    Principalele domenii de cercetare sunt:

    -          studierea proprietăţilor şi mecanismelor de acţiune ale imunomodulatorilor şi adjuvanţilor

    -          determinarea  profilului de citokine în anumite condiţii fiziopatologice (infecţii, cancer) şi investigarea posibilelor corelaţii cu stadiul şi evoluţia bolii, precum şi cu tratamentul

    -          investigarea relaţiei  dintre cancer şi inflamaţie



    Activităţi ştiinţifice


    I. Studii experimentale in vivo şi in vitro privind  imunomodulatorul bacterian CANTASTIM

    CANTASTIM (CS) este un imunomodulator bacterian de generaţia a-II-a, obţinut conform unei metode originale dezvoltate în laboratorul nostru, prin extracţie alcoolică dintr-o tulpină de Pseudomonas aeruginosa. Produsul este un amestec de componente bacteriene, compus în principal din lipide (>80%), lipoproteine, lipopeptide, muramilpeptide şi zaharuri neutre. Datele clinice arată că tratamentul cu CS este eficient în îmbunătăţirea statusului imun al pacienţilor cu infecţii bacteriene şi virale cronice, precum şi al pacienţilor cu cancer, precum şi în prevenirea infecţiilor post-operatorii (administrare înainte de operaţie).


    PROTECTIE NESPECIFICA IN INFECTII BACTERIENE

     

    Folosind un model murin, s-a arătat că administrarea CS induce un efect protector faţă de infecţiile bacteriene, atît profilactic cît şi terapeutic.

    ab

    Salageanu A, Ceacareanu B, Popescu D, Istrate N, Szegli G. Experimental studies on bacterial product

    CANTASTIM derived from Pseudomonas aeruginosa. II. Protective effect in Salmonella typhimurium infection. Rom Arch Microbiol Immunol. 1997, 56(1-2), 17-26

     

    PROTECTIE FATA DE SOCUL ENDOTOXINIC

     

     

    Folosind modelul şoarecilor sensibilizaţi cu galactozamină, s-a demonstrat rolul protector al CS în şocul endotoxinic, ce poate fi, cel puţin parţial, explicat prin scăderea nivelului seric al TNF-alfa pentru şoarecii cărora li s-a administrat CS.


    as

     

    Salageanu A, Szegli G. Experimental studies on bacterial product CANTASTIM derived from Pseudomonas aeruginosa. V. Protective effect in endotoxin shock. Rom Arch Microbiol Immunol. 1999, 58(2), 101-109


    CANTASTIM INDUCE MATURAREA CELULELOR DENDRITICE

     

     

    Folosind un model de explant epitelial auricular murin, s-a aratat că adăugarea  CS în mediul de cultură duce la creşterea semnificativă a numarului de celule dendritice care migrează. De asemenea, tratamentul cu CS al celulelor dendritice obţinute din monocite umane izolate din single periferic conduce la creşterea expresiei markerului de maturare CD83.          Vaccinurile tumorale ce folosesc celule dendritice reprezintă o nouă abordare în imunoterapia cancerului, iar capacitatea de migrare si gradul de maturare ale celulelor dendritice sunt consideraţi parametri esenţiali ai eficacităţii acestei noi terapii.  Pe baza rezultatelor obţinute, CS poate fi considerat un candidat atractiv pentru a fi folosit pentru obţinerea vaccinurilor tumorale.


    ar

    Caras I, Tucureanu C, Lerescu L, Salageanu A. Bacterial Product Cantastim Derived from Pseudomonas aeruginosa Induces Migration and Maturation of Dendritic Cells. Roum Arch Microbiol Immunol. 2007,  66 (1-2), 5-9

     

     

    EFECTUL ADJUVANT

     

     

    Folosind un model murin de imunizare cu anatoxină tetanică (TT), s-a arătat că imunizarea şoarecilor cu TT+CS induce un titru de anticorpi IgG statistic semnificativ mai mare comparativ cu şoarecii imunizaţi numai cu TT. Mai mult, raportul IgG1/IgG2a a fost statistic semnificativ mai mic în grupul şoarecilor imunizaţi cu TT+CS, faţă de TT, iar secreţia de IFN-γ de către splenocitele izolate de la aceşti şoareci, mai mare.

    Rezultatele obţinute sugereză că CS are proprietăţi adjuvante, amplificînd răspunsul imun şi orientîndu-l spre implicarea preferianţială a fenotipului  Thl.


    sd

    Anghelache I F, Caras I, Salageanu A. Adjuvant Properties of Bacterial Product Cantastim. Roum Arch Microbiol Immunol. 2007, 66(1-2), 17-21



    II. Imunologie tumorală


    Evidenţierea imunosupresiei la pacienţii cu cancer mamar şi pulmonar (în colaborare cu Institutul Oncologic “Prof. Dr. Al. Trestioreanu”)

    Imunosupresia este asociată cancerului. Au fost evaluţi o serie de parametri imuni la pacienţi cu cancer mamar şi pulmonar.  Analiza imunofenotipică a arătat că pacienţii investigaţi prezintă valori statistic semnificativ mai mici ale numarului de limfocite în sîngele periferic comparativ cu martori sănătoşi.  Imunosupresia a fost mai evidentă în grupul pacienţilor cu cancer mamar. S-a evidenţiat o capacitate dramatic scăzută de secreţie a IFN-gama. De asemenea, în urma determinării nivelului intracelular de IFN-gama şi IL-4, s-a observat predominanţa unui răspuns imun de tip Th2. In cultură de sînge total, nu s-a observat o micşorare a capacităţii de producere a citokinelor pro-inflamatorii IL-1beta şi TNF-alfa. Cu toate că proporţia celulelor activate a fost uşor mai mică la pacienţii investigaţi faţă de grupul martor, s-a arătat că atît limfocitele T cît şi celulele NK ale pacienţilor cu cancer exprimă markerul timpuriu de activare CD69 în urma stimulării ex vivo cu un mitogen. In concluzie, acest studiu a evidenţiat aspecte ale imunosupresiei la pacienţii cu  cu cancer mamar şi pulmonar. Pe de altă parte, rezultatele obţinute sugerează că o imunoterapie adecvată poate reabilita funcţiile imune compromise, cu efecte benefice atît asupra imunităţii generale cît şi asupra celei antitumorale.


    I. Caras, A. Grigorescu, C. Stavaru, D. L. Radu, I. Mogos, G. Szegli, A. Salageanu Evidence for immune defects in breast and lung cancer patients Cancer Immunol Immunother 2004, 53 (12):1146 – 1152  
    Caras I, Serbanescu IF, Grigorescu A, Salageanu A. Experimental studies on bacterial product cantastim derived from Pseudomonas aeruginosa. VII. Activation of immune cells of healthy controls and cancer patients Roum Arch Microbiol Immunol. 2005 Jan-Dec; 64(1-4):5-10  



    Profilul citokinelor la pacienţi cu cancer colorectal supuşi intervenţiei chirurgicale (în colaborare cu Spitalul Universitar de Urgenţă Bucureşti)


    Citokinele, chemokinele şi factorii de creştere sunt mediatori importanţi atît în răspunsul  imun anti-tumoral  cît şi în imunosupresie. A fost măsurat nivelul seric al unor citokine (IL-6, IL-10, IFNgamma, TNFalpha), chemokine (IL-8, MCP-1, MIP-1alpha, RANTES, CXCL5) şi factori de creştere VEGF (“vascular endothelial growth factor”) şi bFGF (“basic fibroblast growth factor”) la pacienţi cu cancer colorectal, înainte, în timpul şi după operaţie. De asemenea, au fost masurate concentraţiile de IFN-gamma, IL-1beta, IL-1Ra („IL-1 receptor antagonist”), IL-2, sIL-2R alpha („soluble IL-2 receptor”), IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IP-10 („interferon-inducible protein”), MCP-1 si MIP-1alpha în supernatantele de cultură de celule mononucleare izolate din sîngele periferic al pacienţilor (PBMC) stimulate ex vivo cu PHA şi LPS. S-a folosit tehnologia XMap pe (platforma Luminex) care permite detectarea simultană a mai multor parametri într-un volum minim de probă de analizat. S-a arătat ca, înainte de operaţie, nivelul seric al IL-1, IL-6, IL-8 and IL-10 este crescut la pacienţii investigaţi, comparativ cu un lot de donatori sănătoşi, ceea ce poate fi explicat prin existenţa inflamaţiei asociate tumorii.  Statusul intra operator se defineşte ca o “furtună de citokine”, în care se înregistrează valori crescute ale mediatorilor inflamatori, dar şi o creştere a concentraţiei de VEGF şi bFGF. Post-operator, cînd are loc şi procesul de regenerare tisulară, se resimt efectele actului operator, prin creşterea concentraţiei de citokine pro-inflamatorii şi factori de creştere. La pacienţii studiaţi, a fost observată o scădere a imunităţii celulare, prin producerea unui nivel mai scăzut de IL-2 and IFN-gamma de PBMC stimulate ex vivo cu PHA. Aceste rezultate sugerează că atît prezenţa tumorii, cît şi actul chirurgical pot influenţa reţeaua mediatorilor imuni.



    Strategii interventionale de modulare a inflamatiei si imunosupresiei implicate in progresia tumorala: studii experimentale si corelatii clinice” Proiect 41-004,   Parteneriate 2007 (în colaborare cu Institutul Oncologic “Prof. Dr. Al. Trestioreanu”, Universitatea de Medicină şi Farmacie “Carol Davila”, Spitalul Universitar de Urgenţă Bucureşti )


    Progresele recente în domeniul imunologiei tumorale au impus conceptul de “imunoeditare”, plasînd inflamaţia în centrul interacţiei complexe tumoră-micromediu-sistem imun.

    Obiectivele proiectului propus sunt:

    -       evaluarea “background”-ului inflamator la pacienţii cu cancer pulmonar, laringian şi colorectal, precum si a relevanţei acestora

    -       modelarea interacţiilor tumoră-micromediu-sistem imun prin simulare in vitro

    -       modularea in vitro a mecanismelor inflamatorii şi imunosupresoare favorabile progresiei tumorale

    -       corelarea datelor experimentale acumulate cu cele clinice şi identificarea de factori cu valoare prognostică cu utilitate clinică

    In prima etapă a proiectului, pe baza analizei datelor din literatura de specialitate referitoare la rolul inflamaţiei în progresia tumorală, a fost elaborat un model de studiu al impactului la nivel sistemic al mediatorilor inflamaţiei. De asemenea, folosind un protocol experimental adaptat şi perfecţionat, au fost izolate şi cultivate celule tumorale din adenocarcinom colorectal.

    er

     

    we1

     

    Multipli sferoizi (provenind dintr-un fragment tisular de adenocarcinom colo-rectal) la 96h de cultivare in mediu suplimentat cu heparina (solutie 500 U/mL); dimensiuni intre 100 – 500 µm in diametru. Microscopie optica in contrast de faza, obiectiv 10x

     

    Lerescu L, Tucureanu C, Caraş I, Neagu S, Melinceanu L, Sălăgeanu A., Primary cell culture of human adenocarcinomas -practical considerations, Roum Arch Microbiol Immunol. 2008, 67(3-4), 5-16




    LABORATOR IMUNITATE CELULARĂ


    Director General: Dr. RADU Dorel Lucian, CSI, Conferentiar Universitar UMF ‘Carol Davila’, medic primar, e-mail: dorel.radu@cantacuzino.ro.


    Fondator laborator :

    Dr. Olinescu Andrei, medic veterinar, doctor în Ştiinte Medicale, CS I

    1929-2006

    Personal:


    STAVARU Crina, CS III, medic primar, doctor,  e-mail: scrina@cantacuzino.ro – şef laborator

    IANCU Adina Daniela, biolog, asistent cercetare, doctorand e-mail: aiancu@cantacuzino.ro

    GROSU Melania, medic veterinar, doctorand, cercetator stiintific e-mail: gmelania@cantacuzino.ro.

    MIRCIOIU Floarea, PSV

    PETRE Valentina, PSV

    POPISTER Liliana, laborant determinari fizico-chimice


    Telefon: +40-21-528 71 00 ext 5290 / 5190


    Direcţiile de cercetare:


    Laboratorul nostru are o experienţă îndelungată în medicina experimentală, în ultimii 5 ani au fost realizate studii de autoimunitate sau imunitate antiinfecţioasă pe modele murine convenţionale sau transgenice, orientarea principală fiind spre cercetarea aplicată. Pe lângă studiile de medicină experimentală membrii echipei de cercetare participă împreună cercetători din domeniul imunologiei din alte centre de cercetare la elaborarea unui registru naţional al valorilor de referinţă pentru unii parametri imuni precum şi la abordarea unei zone noi de cercetare cea a nanotehnologiei.


    Activităţile ştiinţifice:


    Autoimunitate: Model experimental de diabet de tip 1

    • Investigarea mecanismelor celulare şi moleculare implicate în declanşarea diabetului zaharat insulino-dependent pe un model experimental de şoareci dublu transgenici.
    • Explorarea şi evaluarea complicaţiilor (modificări metabolice, somatice, morfopatologice) induse de diabetul zaharat de tip 1 utilizând un model animal si a diferite modalitati terapeutice.
    • Studiu preliminar pe model experimental murin a neuropatiei diabetice


    Imunitate antiinfecţioasă:

    • Abordarea pe trei secţiuni de cercetare a infecţiei gripale şi a mijloacelor de protecţie prin vaccinare: medicină experimentală, biologie moleculară şi studii clinice pentru elaborarea unei metodologii de evaluare a vaccinurilor gripale.
    • Studiul raspunsului imun pe modele experimentale de infectie cu bacterii Gram pozitive si Gram negative.
    • Dezvoltarea metodologiei de studiu preclinic.


    Parametri de referinţă:

    • Stabilirea limitelor de referinţă şi crearea unui registru naţional de valori pentru parametrii imunologici şi genotoxici.


    Nanotehnologie:

    • Studii in vitro a profilului toxicologic şi farmacologic al compuşilor tip fulerena, reprezintă un nou domeniu de cercetare abordat.


    Publicatii:


    Carte

    • Andrei Olinescu, Angela Dolganiuc Imunologia practica în clinica şi experiment, carte, Ed. Viata Medicala Romaneasca, Bucureşti, 2001. D.L. Radu subcapitol: Tehnica PCR- pg. 203-207, Citotoxicitatea mediata de catre limfocitele T citotoxice 228-232, Crina Stavaru subcapitolul:Analiza imunoenzimatica ELISA -, pg. 153-157,.
    • Dorel Lucian Radu, Experimental models to study type 1 diabetes mellitus in cartea: NEW INSIGHT INTO EXPERIMENTAL DIABETES, Editor: Prof. Dan Cheta, Ed. Academiei Romane, Bucuresti, 2002.
    • L.M. Popescu, C. Ursaciuc, O. Simionescu, A.C. Bancu, D.L. Radu, E. Radu, D. Andronescu, Dictionar de Imunologie Medicala, Ed. Carol Davila, 2002.
    • Andrei Olinescu Momente din istoria Imunologiei româneşti. Comisia naţională de Imunologie (CNI), Ed. Medicală Românească, 2004.
    • Doina Popov, Dorel Lucian Radu, The role of hyperglycemia in the development of diabetic complications investigated in transgenic mouse model in cartea:Vascular involvement in diabetes-Clinical Experimental and Beyond-, Editor: Prof. Dan Cheta, Ed. Acad. Romane, 2005.
    • D.L.Radu, Crina Stavaru, Iuliana Caras, Gina Manda, Monica Neagu, E. Radu, C. Ursaciuc, L.M. Popescu, Metode si Tehnici de Imunologie Umorala si Celulara, Ed. Universitara „Carol Davila” Bucuresti, 2006
    • D.L. Radu coordonator, Studiu experimental si clinic al infectiei gripale si al imunizarii cu vaccinuri gripale, Ed. Universitara „Carol Davila” Bucuresti, 2008.


    Selectie lucrari:

    • R. Breyer, S. Hussein, D.L. Radu, K.M. Putz, S. Gunia, H. Hecker, M. Samii, G.F. Walter, A.C. Stan. Disruption of intracerebral progression of C6 rat glioblastoma by in vivo treatment with anti-CD44 monoclonal antibody. J. Neurosurg. 2000. 92(1):140-149.
    • D.L. Radu, N. Noben-Trauth, J. Hu-Li, W.E. Paul, C.A. Bona. A targeted mutation in the IL-4Ralfa gene protects mice against autoimmune diabetes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. 97(23):12700-12704.
    • D.L. Radu, S. Antohi, A. Bot, A. Miller, A. Mirarchi, C.A. Bona. Effect of maternal antibodies on influenza virus-specific immune response elicited by inactivated virus and naked DNA. Scand. J Immunol. 2001. 53:1-10.
    • D.L. Radu, T. Kodera, C.A. Bona.Expression of activation-induced cytidine deaminase decreases throughout the life. J Cell Mol Med 2003. 7(2):141-145.
    • C.A. Bona, D.L. Radu, T. Kodera. Molecular studies on the diversification of hemagglutinin-specific human neonatal repertoire subsequent to immunization with naked DNA. Vaccine 2004. 22(13-14):1624-1630.
    • Stavaru Crina, Olinescu A., ‘The assement of cellular immunity în subjects presenting different immune disorders , Rom. Arch. Microbiol. Immunol, 60, (4), 297-305, 2001
    • Dolganiuc Angela, Pană Marina, Ghiţă Maria, Stăvaru Crina, Olinescu A.,Flow cytometric determination of Enterococcus spp. Susceptibility to four antimicrobial agents’ Rom. Arch. Microbiol. Immunol, 60,(4), 307-322,2001.
    • Caras I., Grigorescu A., Stavaru C., Radu D.L., Szegli G., Salageanu A., Evidence for immune defects in breast and lung cancer patients, Cancer Immunol. Immunother., 2004, 53, (12), 1146-52.
    • D.L. Radu, A. Georgescu, C. Stavaru, A. Carale, D. Popov, Double transgenic mice with Type 1 diabetes mellitus develop somatic, metabolic and vascular disorders. J.Cell.Mol.Med.2004, 8(3), 349-358.
    • Stavaru Crina, Caplanus A, Radu D.L. Phenotypical changes during in vitro cultivation of monocytes derived immature dendritic cells, Roum Arch.Microbiol Immunol, 63 (1-2), 35-46, 2004.
    • Stavaru Crina, Dumitrescu Viorica, Lemeni Daniela, Georgescu Ion Bogdan Teodor, Codita Irina, Radu D. L. Microbiological and immunological study of Staphylococcus vaccine effects in periodontitis, Rom. Arch. Microbiol. Immunol, 11-16, 1-4,(64),2005.
    • Pistol G, Matache C, Calugaru A, Stavaru C, Tanaseanu S, Ionescu R, Dumitrache S, Stefanescu M., Roles of CD147 on T lymphocytes activation and MMP-9 secretion in systemic lupus erythematosus, J Cell Mol Med. 2007 Mar-Apr;11(2):339-48.




    Bine ati venit pe site-ul

    LABORATORULUI RECEPTORI CELULARI


    Echipa:

    Sef Laborator

    Cristiana MATACHE, doctor in biochimie, csI

    cristianamatache@cantacuzino.ro

     

    Cercetatori

    Maria STEFANESCU, doctor in biologie, csI, Director Centrul de Studii Avansate

    mstefanescu@cantacuzino.ro

    Gina PISTOL, doctorand, csIII

    gpistol@cantacuzino.ro

    Leontina Mirela BANICA, doctorand, cercetator

    lbanica@cantacuzino.ro

    Alina Nicoleta BESLIU, doctorand, cercetator

    abesliu@cantacuzino.ro

    Cristina CHITONU, asistent de cercetare

    rcg@cantacuzino.ro

    Carmen-Maria MARICA, student master, asistent de cercetare

    rcg@cantacuzino.ro

     

    Personal tehnic

    Daniela FLORESCU, operator chimist

    Doina PROTEASA, laborant determinari fizico-chimice


    Tematica:

    Principalele obiective stiintifice ale acestui grup sunt:

    • studiul defectelor celulare si moleculare implicate in etiopatologia bolilor de tesut conjunctiv;
    • descifrarea mecanismelor celulare si moleculare care controleaza balanta dintre imunitate si toleranta in conditii normale si patologice (boli de tesut conjunctiv);
    • identificarea proceselor celulare sau proteinelor intra si extracelulare anormale ca potentiale tinte de terapie pentru bolile de tesut conjunctiv.



    Proiecte de cercetare:

    • Cercetari de genomica si proteomica in patogenia Sclerozei Sistemice in vederea deschiderii de noi perspective terapeutice (SScHELP): PNII 41-021/2007-2010
    • Studii de inducere in vitro a expandarii celulelor T reglatoare – o noua cale terapeutica in boli autoimune, alergice si pentru prevenirea rejectiei grefelor: PN 09220302/2009



    Raport de activitate:

    Studiile efectuate asupra Lupusului Eritematos Sistemic (LES) in scopul descifrarii mecanismelor celulare si moleculare responsabile de statusul de hiperactivare al limfocitelor periferice (PBLs) au condus la rezultate originale care au aratat:

    -          existenta unui nivel crescut de fosforilare pe tirozina al proteinelor intracelulare;

    -          o activitate crescuta si expresie redusa la nivel de proteina si ARNm a tirozin kinazei p56lck;

    -          apoptoza accelerata a PBLs pacientilor cu LES se coreleaza direct cu activitatea specifica crescuta a kinazei p56lck;

    -          calea de semnalizare PI3K/Akt/mTOR in celulele T CD4+ periferice ale pacientilor cu LES este hiperactiva, asa cum rezulta din activitatea crescuta a kinazelor Akt si p70S6k. Activarea celor doua kinaze, Akt si p70S6k, pare a contribui la reducerea expresiei inhibitorului kinazelor dependente de ciclina, p27kip1, ceea ce permite acumularea la pacientii cu LES a celulelor T in fazele S si G2/M ale ciclului celular, de unde apoi celulele vor evolua spre apoptoza;

    -          celulele mononucleare periferice ale bolnavilor de LES exprima activitate crescuta de MMP-9 si secreta spontan niveluri crescute de MMP-9, nivelul de TIMP-1 secretat fiind normal.


    Studiile efectuate in scopul reglarii mecanismelor celulare si moleculare perturbate din LES au sugerat:

    -          Pycnogenol® (un extract din scoarta pinului maritim francez) poate fi utilizat in LES ca terapie secundara pentru a reduce aspectele inflamatorii cronice;

    -          CD147, un inductor important al MMPs, este supraexprimat pe limfocitele TCD3+ periferice ale bolnavilor de LES. Studiile suplimentare au sugerat ca CD147 poate fi o buna tinta pentru terapia LES.

    Studiile asupra mecanismelor tolerantei imune periferice in boli de tesut conjunctiv au aratat ca:

    -          procentul de celule T reglatoare periferice este foarte redus in unele boli de tesut conjunctiv cum ar fi: LES, scleroza sistemica, sindromul Sjogren, poli si dermatomiozita, boala mixta de tesut conjunctiv;

    -          functie de tipul de boala, de activitatea bolii, prezenta autoanticorpilor si terapie, celulele T reglatoare exprima anormal unii dintre markeri fenotipici (CD25, GITR, CD152, CD45RO sau markerul molecular Foxp3);

    -          celulele T reglatoare pot fi o noua tinta terapeutica pentru bolile de tesut conjunctiv.

    Toate aceste studii au fost realizate in colaborare cu clinicieni si specialisti in domeniu (Universitatea de Medicina si Farmacie „Carol Davila”, Spitalul Clinic Colentina, Spitalul Clinic de Nefrologie „Carol Davila”, Spitalul Clinic de Urgenta „Sf. Pantelimon”, Institutul de Boli Infectioase „Matei Bals”, Institutul National de Cercetare Dezvoltare „Victor Babes”, Institutul National de Biologie si Patologie Celulara „Nicolae Simionescu”) impreuna cu care, in anul 2005, am infiintat in INCDMI „Cantacuzino” primul centru pentru studiul tolerantei imune.


    Publicatii:

    Lucrari publicate in perioada 2001-2009:

    Alina Nicoleta Besliu, Gina Pistol, Carmen Maria Marica, Leontina Mirela Banica, Cristina Chitonu, Ruxandra Ionescu, Cristina Tanaseanu, Isabela Tamsulea, Cristiana Matache and Maria Stefanescu. PI3K/Akt signaling in T lymphocytes of Systemic Lupus Erythematosus peripheral blood. Romanian Archives of Microbiology and Immunology, 2009, 68 (2): in press.


    Alina Nicoleta Besliu, Leontina Mirela Banica, Ruxandra Ionescu, Denisa Predeteanu, Crina Stavaru, Carmen Maria Marica, Cristina Chitonu, Gina Pistol, Maria Stefanescu, and Cristiana Matache. Role of cellular immunity in Systemic Sclerosis pathogenesis: update on CD4+T cells population studies. Romanian Archives of Microbiology and Immunology, 2009, 68 (1): 35-42.


    Leontina Banica, Alina Besliu, Gina Pistol, Crina Stavaru, Ruxandra Ionescu, Ana-Maria Forsea, Cristina Tanaseanu, Sergiu Dumitrache, Dan Otelea, Isabela Tamsulea, Stefanita Tanaseanu, Cristina Chitonu, Simona Paraschiv, Monica Balteanu, Maria Stefanescu and Cristiana Matache. Quantification and molecular characterization of regulatory T cells in connective tissue diseases. Autoimmunity, 2008, 42 (1): 41-9.


    Gina Pistol, Cristiana Matache, Ana Calugaru, Crina Stavaru, Stefanita Tanaseanu, Ruxandra Ionescu, Sergiu Dumitrache and Maria Stefanescu. Roles of CD147 on T lymphocytes activation and MMP-9 secretion in Systemic Lupus Erythematosus. Journal of Cellular and Molecular Medicine. 2007,11 (2): 1-10.


    D. Jinga, A. Blidaru, I. Condrea, C. Ardeleanu, C. Dragomir, G. Szegli, M. Stefanescu and C. Matache. MMP-9 and MMP-2 gelatinases and TIMP-1 and TIMP-2 inhibitors in breast cancer: correlations with prognostic factors. Journal of Cellular and Molecular Medicine. 2006,10 (2): 499-510.


    Jinga D, Stefanescu M, Blidaru A, Condrea I, Pistol G and Matache C. Serum levels of matrix metalloproteinases MMP-2 and MMP-9 and their tissue natural inhibitors in breast tumors. Romanian Archives of Microbiology and Immunology. 2004,63(3-4):141-58.


    Matache C, Stefanescu M, Dragomir C, Tanaseanu S, Onu A, Ofiteru A, Szegli G. Matrix metalloproteinase-9 and its natural inhibitor TIMP-1 expressed or secreted by peripheral blood mononuclear cells from patients with systemic lupus Erythematosus. Journal of Autoimmunity. 2003,20(4):323-31.


    Stefanescu M, Matache C, Onu A, Tanaseanu S, Dragomir C, Constantinescu I, Schonlau F, Rohdewald P, Szegli G. Pycnogenol efficacy in the treatment of systemic lupus erythematosus patients. Phototherapy Research. 2001,15(8):698-704.


    Matache C, Onu A, Stefanescu M, Tanaseanu S, Dragomir C, Dolganiuc A, Szegli G. Dysregulation of p56lck kinase in patients with systemic lupus erythematosus. Autoimmunity. 2001,34(1):27-38.



    Comunicari:

    Lucrari comunicate la manifestri stiintifice in perioada 2007-2008:

    A 38 a Conferinta a Societatii de Imunologie din Romania. 24-26 Septembrie 2008, Busteni, Romania. A new therapeutic way in autoimmune diseases – ex vivo regulatory T cells expansion. L. Bănică, A. Beşliu, C. Stăvaru, R. Ionescu, C. Tănăseanu, Şt. Tănăseanu, M. Ştefănescu and C. Matache


    6thInternational Congress on Autoimmunity. Porto, Portugal, September 10-14, 2008. Effects of some cellular and molecular defects on anti-DNA topoisomerase I antibodies production in Systemic Sclerosis patients. M. Stefanescu, L. Banica, A. Besliu, G. Pistol, C. Stavaru, R. Ionescu, A.M. Forsea, C. Tanaseanu, S. Dumitrache, D. Otelea, M. Balteanu, and C. Matache


    6thInternational Congress on Autoimmunity. Porto, Portugal, September 10-14, 2008. CD100 expression level on peripheral blood T and B cells from patients with Systemic Sclerosis. C. Matache, A. Besliu, L. Banica, D. Predeteanu, R. Ionescu, C. Marica, L. Varzaru and M. Stefanescu


    4rdMeeting of Young Rheumatologists Across Europe. Ianuarie 11 – 20, 2008, Reichenau, Austria. Abnormalities at the level of E3 ubiquitin ligases in peripheral blood T cells from Systemic Lupus Erythematosus patients. Leontina Banica, Alina Besliu, Gina Pistol, Maria Stefanescu, Stefanita Tanaseanu, Ruxandra Ionescu, Cristina Tanaseanu, Radu Eugen and Cristiana Matache, publicat in Joint Bone Spine, 2008, 75, 2, pg 246


    4th Meeting of Young Rheumatologists Across Europe. Ianuarie 11 – 20, 2008, Reichenau, Austria. Systemic Lupus Erythematosus: the involvement of PI3K/Akt/mTOR pathway in cellular cycle and in early apoptosis. Alina Besliu, Leontina Banica, Cristiana Matache, Stefanita Tanaseanu, Ruxandra Ionescu, Sergiu Dumitrache, Crina Stavaru and Maria Stefanescu, publicat in Joint Bone Spine, 2008, 75, 2, pg 246

    3rdMeeting of Young Rheumatologists Across Europe. Ianuarie 18 – 20, 2007, Reichenau, Austria. Deciphering of PI3K/Akt/mTOR Pathway in Peripheral T Lymphocytes Isolated From Patients With Systemic Lupus Erhytematosus. Gina Pistol, Leontina Banica, Alina Besliu, St. Tanaseanu, Cristiana Matache, Maria Stefanescu, publicat in Joint Bone Spine, 2007, 74, 2, pg216


    27th European Workshop in Rheumatology Research. Februarie 22 – 24, 2007, Florence, Italia. Level and characteristics of natural regulatory T cells in vascular-connective tissue autoimmune diseases. Leontina Banica, Alina Besliu, Gina Pistol, Crina Stavaru, Ruxandra Ionescu, Ana-Maria Forsea, Cristina Tanaseanu, Isabela Tamsula, Dan Otelea, Maria Stefanescu, Cristiana Matache, publicat in Annals of the Rheumatic Diseases. 2007, 66: A68-A69 202 Suppl. 1


    World Immune Regulation Meeting. Aprilie 11-15, 2007, Davos, Elvetia. Quantification of Regulatory T Cells in Patients With Vascular-Connective Autoimmune Diseases, Leontina Banica, Maria Stefanescu, Gina Pistol, Alina Besliu, Crina Stavaru, Ruxandra Ionescu, Cristina Tanaseanu, Stefanita Tanaseanu, Ana Maria Forsea, Sergiu Dumitrache, Dan Otelea, Cristiana Matache